Technika prepojeného enzýmového imunoabsorpčného testu-v angličtine Enzyme-Linked Immuno Assay-alebo ELISA test je imunologický test, ktorý umožňuje detekciu alebo test molekúl v biologickej vzorke. Bol navrhnutý a vyvinutý dvoma švédskymi vedcami, Petrom Perlmannom a Evou Engvallovou na Štokholmskej univerzite v roku 1971.

Molekuly testované metódou ELISA sú spravidla proteíny. Medzi typy vzoriek patria tekuté biologické materiály -plazma, sérum, moč, perspirant -, kultivačné médium pre bunky alebo rekombinantný proteín -proteín produkovaný bunkou, ktorej genetický materiál bol zmenený genetickou rekombináciou -purifikovaný do roztoku.

Test ELISA sa používa hlavne v imunológii na detekciu a / alebo meranie prítomnosti bielkovín, protilátok alebo antigénov vo vzorke. Tento sérologický test detekuje predovšetkým protilátky produkované telom v reakcii na vírusovú kontamináciu.

Špecifickou a rýchlou metódou je použitie protilátok na diagnostiku infekčných chorôb. Technika ELISA je imunoenzymatická technika, ktorá umožňuje z biologickej vzorky zobraziť reakcie medzi antigénom-telom, ktoré živý organizmus považuje za cudzí-a protilátkou pomocou farebnej reakcie produkovanej enzýmovým markerom- spravidla alkalická fosfatáza a peroxidáza - predtým viazané na protilátku. Farebná reakcia potvrdzuje identifikáciu izolovanej baktérie alebo prítomnosť požadovaného vírusu a intenzita farby naznačuje množstvo antigénov alebo protilátok v danej vzorke.

Existujú štyri hlavné typy testov ELISA:

• ELISA priamo, umožňuje detegovať alebo merať protilátky. Používa iba primárnu protilátku;
• ELISA nepriama, najpoužívanejšie, tiež umožňuje detegovať alebo testovať protilátky. Používa sekundárnu protilátku, ktorá jej dodáva lepšiu citlivosť ako priama ELISA;
• ELISA v súťaži, umožňuje dávkovanie antigénov. Vyrába sa súťažou o dlhopisy a nepoužíva enzým;
• ELISA „v sendviči“, umožňuje dávkovanie antigénov. Táto technika sa bežne používa vo výskume.

Test ELISA sa používa na:

• Nájdite a zmerajte protilátky v sérológii na diagnostiku infekčných chorôb: virológia, parazitológia, bakteriológia atď .;
• Dávka bielkovín v nízkych koncentráciách: špecifické dávky určitých plazmatických bielkovín (imunoglobulín E (IgE), feritín, proteínové hormóny atď.), Nádorové markery atď .;
• Dávkujte malé molekuly: steroidné hormóny, hormóny štítnej žľazy, lieky ...

Test ELISA sa používa najmä na diagnostiku mnohých infekčných chorôb:

Sexuálne prenosné choroby (STD)

Vrátane hepatitídy, syfilisu, chlamýdií a HIV. Odporúčané zdravotnými úradmi je hlavným skríningovým testom na AIDS: ukazuje prítomnosť anti-HIV protilátok a antigénu p24 šesť týždňov po infekcii.

Regionálne alebo endemické choroby

Žltá zimnica, vírus Marburg (MVM), Ladengue, Lymská choroba, Chikungunya, horúčka v údolí Rift, ebola, horúčka Lassa atď.

Covid-19

Test ELISA, ktorý sa má vykonať viac ako 2 až 3 týždne po nástupe symptómov, umožňuje identifikovať prítomnosť protilátok anti-SARS-CoV-2 za menej ako hodinu.

Vírusové patogény, ktoré spôsobujú prenatálne infekcie

Napríklad toxoplazmóza, rubeola, cytomegalovírus, herpes simplex.

Iné prípady

Našiel však aj aplikácie v detekcii:

• Tehotenstvo;
• Autoimunitné ochorenia;
• Potravinové alergény: kvantitatívne stanovenie celkových imunoglobulínov E (IgE) pomáha pri hodnotení a liečbe alergií;
• Hormonálne poruchy;
• Nádorové markery;
• Vírusy rastlín;
• A mnoho ďalších

V rámci detekcie protilátok anti-SARS-CoV-2 pilotná štúdia, ktorú v auguste 2020 uskutočnili inštitúty Pasteur, CNRS, Inserm a Parížska univerzita, potvrdzuje spoľahlivosť testu ELISA: oba testované testy ELISA používajú celý N proteín SARS-CoV-2 (ELISA N) alebo extracelulárna doména vírusového hrotu (S) ako cieľové antigény. Táto technika by umožnila identifikovať protilátky vo viac ako 90% prípadov s veľmi nízkou mierou falošne pozitívnych výsledkov 1%.

Testy Elisa, ktoré sa vykonávajú v analytických laboratóriách na lekársky predpis, stoja okolo 10 eur a sú hradené zo zdravotného poistenia 100%.

Vykonávajú sa v bezplatných informačných, skríningových a diagnostických centrách (CeGIDD) a môžu byť bezplatné pre HIV a SARS-CoV-2.